Akademik deneyler için protein elektroforezi iş akışlarını eşleştirmek üzere geliştirilen bu Araştırma Sınıfı Antikor Reaktifleri, 6x SDS-PAGE protein yükleme tamponu ile uyumlu bir şekilde çalışarak sonraki antikor hibridizasyonu ve tanımlama deneyleri için protein antijen durumunu stabilize eder.
SDS-PAGE protein yükleme tamponu (6x), yumurta beyazı protein örneklemesi de dahil olmak üzere geleneksel SDS-PAGE tespitine uygulanabilen, bromofenol mavisi izleme boyası eklenmiş, modifiye edilmiş altı kat konsantre protein yükleme tamponudur. Bu tampon, indirgeyici ajan DTT ile önceden formüle edilmiştir ve hafif tahriş edici bir koku taşır.
Kullanım yöntemi
6x SDS-PAGE yükleme tamponunu oda sıcaklığında veya 37°C'yi aşmayan bir su banyosu sıcaklığında çözün. Tamponu, ılık su banyosunda çözüldükten hemen sonra muhafaza için oda sıcaklığına aktarın; su banyosunda uzun süre inkübasyon önerilmez.
Protein numunesini ve 6x yükleme tamponunu, 5 μL protein numunesinin hacim oranında 1 μL 6x yükleme tamponuna karıştırın.
Tam protein denatürasyonunu gerçekleştirmek için karışımı 95°C~100°C'lik kaynar su banyosunda 10 dakika ısıtın.
Karışımı oda sıcaklığına kadar soğutun, ardından numuneleri doğrudan SDS-PAGE jel numune kuyularına yükleyin.
Genel durumlarda bromofenol mavisi jelin dibine göç ettiğinde elektroforezi sonlandırın.
Laboratuvar Antikor Reaktifleri, günlük laboratuvar testlerinde bu 6x yükleme tamponuna iyi uyum sağlar. Eşleşen denatürasyon koşulu, protein epitoplarını sağlam tutar ve moleküler laboratuvarlarda rutin Western blot ve diğer antikora bağımlı protein doğrulama çalışmaları için deneysel dalgalanmayı azaltır.
Notlar
Isıtmadan önce protein numuneleri veya yükleme tamponu içinde genellikle 8-10 dakika ısıtıldıktan sonra kaybolan viskoz yarı saydam bir madde görünür. Başlangıç hücre/doku dozajı büyük miktarda genomik DNA ile birlikteyse, 10 dakikalık ısıtmadan sonra yapışkan yarı saydam maddeler kalabilir. Kullanıcıların 10 dakika daha kaynatması veya uygun miktarda 6x yükleme tamponu ilave etmesi ve ardından 5 dakika kaynatması gerekir. Yeterli kaynatma, takip eden yükleme adımlarına müdahale etmeden, genomik DNA'ya bağlı proteinleri tamamen soyar ve viskoziteyi ortadan kaldırmak için kısmi genomik DNA'yı kırar.
Uygulamadan önce 6x SDS-PAGE protein yükleme tamponunun tamamen çözünmesi gereklidir; tekrarlanan donma-çözülme döngülerinin önlenmesi gerekir.
Bu ürün yalnızca profesyonel bilimsel araştırmalarla sınırlıdır. Klinik teşhis, hastalık tedavisi, gıda işleme veya farmasötik üretim için benimsenemez.
Kişisel güvenliği ve fiziksel sağlığı garanti altına almak için çalışma boyunca laboratuvar önlüğü ve tek kullanımlık eldivenler giyin.
Eşleşen tüm Antikor Reaktifleri kesinlikle yalnızca laboratuvar araştırma senaryoları için üretilmiştir. Bu yükleme tamponunun sunduğu denatüre edici ortam, antikor reaktifleriyle stabil bir deney sistemi oluşturarak elektroforez membran transferinden sonra güvenilir antijen-antikor bağlanmasını sağlar.
Chensi Biotechnology (Kunming) Co., Ltd
Şimdi başvurun