Korunmuş Renkli Protein İşaretleyici (10-250kDa)

Bu korunmuş renkli protein işaretleyici, elektroforez sırasında kolay tanımlama için tasarlanmış bant renkleri ile 10 kDa ila 250 kDa arasında değişen 11 saflaştırılmış protein içerir. 72 kDa bandı turuncu renkte, 25 kDa bandı yeşil renkte ve geri kalan dokuz bant mavi renkte görünür. Bu işaretleyici, SDS-poliakrilamid jel elektroforezinde protein ayırma verimliliğini izlemek, PVDF, naylon veya nitroselüloz membranlara Western blot transfer performansını değerlendirmek ve rutin laboratuvar iş akışlarında protein molekül ağırlığını tahmin etmek için yaygın olarak kullanılır. Doku kesitlerinin Parafin Mikrotomu kullanılarak hazırlandığı histoloji laboratuvarlarında bu işaretleyici, aynı dokudan türetilmiş numuneler üzerinde aşağı yönlü immünolojik test analizinden önce protein bütünlüğünü doğrulamak için sıklıkla bir kalite kontrol referansı olarak kullanılır. İşaretleyici, yükleme tamponunda kullanıma hazır olarak sağlanır ve numune yüklemeden önce herhangi bir ısıtma, seyreltme veya indirgeyici madde eklenmesi gerekmez.

Tampon formülasyonu protein stabilitesini ve tutarlı elektroforetik migrasyonu sağlar. En iyi sonuçları elde etmek için işaretleyicinin oda sıcaklığında çözülmesi, kullanılmadan önce iyice karıştırılması ve kaynatılmaması gerekir. Kuyu başına 5 ila 10 ul'lik bir numune hacmi önerilir; 5 x 1,5 mm jellerde net bant görselleştirmesi için tipik olarak 5 ul yeterlidir. İlk kez kullanan kullanıcılar, maliyet ve görüntü kalitesini dengelemek için belirli jel koşullarına ve deneysel alışkanlıklara dayalı ön deneyler yoluyla optimum yüklemeyi belirlemelidir. Bant difüzyonuna neden olabileceğinden elektroforez süresinin aşırı uzatılmasından kaçınılmalıdır. Doku örneği tanımlama ve etiketleme için Gömülü Kaset Yazıcı ve Slayt Yazıcı kullanan laboratuvarlar, doku kesitlerinde immün boyama prosedürlerini takip eden protein saptama iş akışları için referans standart olarak bu işaretleyiciye de güvenmektedir.

Bu protein işaretleyicisi, Western blotlama ve protein transfer doğrulaması da dahil olmak üzere çok çeşitli immün algılama uygulamaları için uygundur. Aktarımdan sonra deneysel bant verileri, yarı kantitatif protein tahmini için dansitometri veya görüntüleme yazılımı kullanılarak daha da analiz edilebilir. Gelişmiş görüntüleme iş akışlarında, 2D/3D Tüm Slayt Doku ve Hücre Görüntüleme Kantitatif Analiz Sistemi, tüm doku kesitlerindeki protein ekspresyon modellerini ölçmek için kullanılabilir; bu işaretleyici, aşağı yönlü analiz için moleküler ağırlık referansı görevi görür. İşaretleyici, iyice karıştırılarak çözüldükten sonra -20°C'de 12 aya kadar veya 4°C'de 3 aya kadar saklanmalıdır. Tekrarlanan donma-çözülme döngülerinden kaçınılmalıdır; Düzenli kullanım için porsiyonlama önerilir. Parafin Balmumu Eritici ve Parafin Düzeltici gibi destek ekipmanları, doku işleme, gömme, kesit alma ve protein analizinin sırayla gerçekleştirildiği entegre histopatoloji iş akışlarında sıklıkla bu işaretleyicinin yanında kullanılır. Kullanım sırasında laboratuvar önlükleri ve tek kullanımlık eldivenler de dahil olmak üzere standart laboratuvar güvenliği uygulamalarına uyulmalıdır.